感覺(jué)態(tài)細(xì)胞描述的是細(xì)胞所處的一種狀態(tài)，在這種狀態(tài)下，細(xì)胞膜可以允許外源重組質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，且不會(huì)被限制性核酸內(nèi)切酶水解。
感覺(jué)態(tài)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)操作步驟：
將電轉(zhuǎn)杯和微量離心管至于冰上。
從冰箱取出電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞，放置在冰盒中直至*融化。
當(dāng)細(xì)胞溶解*后，輕輕拍打混勻。取出細(xì)胞至置于冰上的預(yù)冷微量離心管中。
如果使用克隆或連接試劑盒的連接Buffer，取熱滅活的連接產(chǎn)物到細(xì)胞中（沒(méi)有進(jìn)行熱滅活的連接產(chǎn)物會(huì)抑制轉(zhuǎn)化反應(yīng)），用槍頭輕輕攪動(dòng)；不要上下吹打混勻，這樣會(huì)產(chǎn)生氣泡并使細(xì)胞升溫。使用連接產(chǎn)物會(huì)引起電轉(zhuǎn)過(guò)程中的電弧。
輕輕的將細(xì)胞/DNA混合物轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的電轉(zhuǎn)杯中，注意避免產(chǎn)生氣泡。用手指快速地將試管向下輕彈，使細(xì)胞沉積在井電轉(zhuǎn)杯的底部。根據(jù)以上推薦的電轉(zhuǎn)條件進(jìn)行電轉(zhuǎn)。
在脈沖10s內(nèi)，加RecoveryMedium到電轉(zhuǎn)杯，用槍上下吹打重懸細(xì)胞，然后將含有細(xì)胞的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到無(wú)菌培養(yǎng)管中。
將培養(yǎng)管放在搖床上，37℃培養(yǎng)1h。
從培養(yǎng)管中取轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞涂布于含特定抗生素的LB（或其他培養(yǎng)基）瓊脂糖平板上。
注意事項(xiàng)
?、?00nm波長(zhǎng)處的OD值超過(guò)0.5要重新接種，重新培養(yǎng)；
?、谠撨^(guò)程中所有用到的培養(yǎng)基均是無(wú)抗性的。
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